RNA甲基化修飾試劑盒?
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? ? RNA甲基化修飾試劑盒包括了所有定性修飾總RNA樣本的必要試劑。獨特轉化試劑包含了 RNA保護劑,有效防止了化學試劑和嗜熱試劑的降解。這樣提高了胞嘧啶轉化為尿嘧啶的 效率,胞嘧啶脫氨基作用可以可以忽略不計。無毒的RNA捕獲溶液增強了RNA結合在柱基 質上的能力,這樣轉化后的RNA可以有效地被洗脫同時將亞硫酸氫鹽和鹽分徹底**。更 值得一提的是,在這個試劑盒中我們配套的提供了一對特異性的甲基化引物,極大地方便了 您進行qMSP分析。?
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此品非常適合從細胞與組織等樣本中提取的總RNA,進行RNA甲基化修飾操作,整個實驗時間僅需3小時。?
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使用必讀:
使用:采用RNA甲基化修飾試劑盒處理得到的轉化RNA對于像甲基化特異性PCR, MS-HRM,和亞硫酸鹽測序如:焦磷酸測序和深度測序是非常理想的。其中總RNA可以是 來自哺乳動物,植物,**,**和病毒等樣本中得到的。 ?
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RNA輸入量:對于每次亞硫酸鹽實驗RNA的輸入量是5 ng-1 ug.**為理想的RNA的輸入 量應該是200 – 500 ng。當使用RNA甲基化修飾試劑盒做甲基化特異性RT-PCR時,RNA的 輸入量可以少至<10 ng,但是PCR循環數應該多于45。RNA處理后的得率取決于RNA的輸 入量,自然的RNA量和起始材料來源。?
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起始材料:非常適合使用各種細胞和組織樣本,比如:來自培養瓶和微孔板培養的細胞, **和冷凍的組織,石蠟包埋組織,血液,體液樣本等等。?
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預防措施: ??? ? 為了避免交叉污染,接下來的預防措施是非常有必要的。F-Spin Columns:仔細地吸 取樣本或溶液到 F-Spin Columns。使用**的槍頭并在轉移完不同的溶液時隨時更換。在 將 F-Spin Columns 放到微型離心機前始終保證蓋子是蓋緊的。在整個操作步驟中必須帶干 凈的手套。為了避免手套接觸.
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這個工具是專門為亞硫酸氫鹽轉化和驗證RNA而設計的,具有如下的優勢和特性:?
? ?快速簡便的操作流程僅需 3 小時 ? ?
? ?將未甲基化的 RNA 胞嘧啶**轉化為尿嘧啶,轉化率>99.9 ;不當或錯誤的轉化 率<0.1 。 ??
? ?強給力的 RNA 保護劑有效防止了 RNA 的降解,保護了>90的 RNA。 ??
? ?包括的對照引物是專門針對特異轉化后的 RNA 設計的,可以用來測試其是否**正確的實現了 亞硫酸鹽轉化。 ?
? ?可用于亞硫酸鹽轉化的 RNA 低至每次反應 5 ng ?
? ? 簡單、可信和實驗條件始終如一。 ?