細胞表觀DNA進口實驗總體RNA甲基化極易定量熒光法檢測試劑盒,總體RNA甲基化極易定量檢測試劑盒。這款試劑盒有如下的優勢和特點:?
?極速:整個操作步驟僅需 2 小時 40 分鐘完成。基于一個樣本 2 份分析測定。
?穩定:這款試劑盒容許分析過程有更大的信號窗口,且復孔只有微小的變化。
?方便:內在低背景噪音,可以**孔板阻斷的步驟。
?高敏,檢測的**低下限為 0.02的 5-mC RNA,RNA 輸入量是:200ng 。
?特異性:高特異性地結合 5-mC,在未甲基化的胞嘧啶或羥甲基化胞嘧啶不會產生交叉反應;針對不 同的濃度范圍的樣本 RNA。 ?
?普遍性:陽性對照和陰性對照容許對任何物種的 RNA,檢測 5-mC RNA。
?**性:**佳的陽性對照是可以按照一定的百分比,分成幾部分,然后繪制**曲線,**性更高。 結果堪比 HPLC-MS 色譜分析。甚至更優。 ?
?靈活性:96 孔可拆卸板模式使研究人員能根據自己需要選擇手工或是高通量模式分析。 ?操作簡便、可信、分析條件始終如一。 ?
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細胞表觀DNA進口實驗總體RNA甲基化極易定量熒光法檢測試劑盒使用必讀:?
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使用:總體RNA甲基化極易定量檢測試劑盒) 專門為定量檢測總RNA中 RNA 甲基化水平而設計的。其中總RNA可以是來自哺乳動物,植物,**,**和病毒等樣本 中得到的,但不**于此,培養細胞、**和冷凍的組織、血漿/血清樣本和體液等樣本。 ?
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RNA輸入量:對于每次實驗RNA的輸入量是50-300 ng.**為理想的RNA的輸入量應該 是200 ng,正如我們所知,在某些種屬中RNA中的5-mC通常不到總RNA的0.1。?
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起始材料:非常適合使用各種細胞和組織樣本,比如:來自培養瓶和微孔板培養的細胞, **和冷凍的組織,石蠟包埋組織,血漿/血清樣本,體液樣本等等。?
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內控:這個試劑盒中包括了陽性RNA對照和陰性RNA對照。使用0.05到2 的RNA 對照繪制**曲線。因為不同的組織之間RNA中5-mC的含量不一樣;正常的和病變的部分 也不一樣;或處理和不處理的條件。因此,我們建議使用二份樣本來做,這樣可以保證生成 信號的可信性。這個試劑盒容許實驗人員對于RNA進行定量并且**好是取二份不同提取的 RNA樣本對于RNA進行相對定量分析。?
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預防措施: ? ? ? 為了避免交叉污染,小心的吸取樣本或將溶液添加到微孔板中。使用帶濾芯的吸頭, 并且在不同溶液的轉移中,要及時的更換槍頭。在整個實驗操作過程中,建議帶上手套。如 果手套與樣本有接觸,應該立即更換新的手套。?
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產品簡介?
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? ? ? 在 DNA 中 5-甲基胞嘧啶通過 DNA 甲基轉移酶甲基組的同價原理發生在胞嘧啶環的第五位碳原子上。這個過 程很好地被研究并且通常伴隨有基因的表達和抑制。尤其是在人類中觀測到,5-甲基胞嘧啶發生在各種形式的 RNA 分子中,包括 tRNAs,rRNAs,mRNAs 和非編碼 RNAs。5-甲基胞嘧啶看起來都富集于 ncRNA這類中,但是相對的在 mRNAs 中是在減少。 5-甲基胞嘧啶的水平在動物基因組中是不一樣的,水平量在一些昆蟲中不被發覺的到在人類細胞中大概有 0.1-0.45的總 RNA 量。大多數的 5-甲基胞嘧啶是在mRNAs 中發現的。在這些轉錄中,5-甲基胞嘧啶在蛋白編碼測序中出現減少;而在 5’和 3’UTRs 中出現富集。眾所周知,2 種不同的甲基轉移酶,NSUN2 和 DNMT2 在真核生物 RNA 中通過催化 5-甲基胞嘧啶的修飾形式,會減少 5-mC。現在已經有很有力的證據表明:RNA 胞嘧啶的甲基化影響著各種生物進化的規則例如:
? ? ?RNA 穩定性和 mRNA 翻譯。此外,在拱形 RNAs 中 5-mC 的缺失會異常的引起相關的小 RNA 片段化且這些小 RNA發揮著正常的功能。因此,拱形 ncRNA 的損失可能有助于發現人類因缺失 NSUN2 而引起的發揮失調